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贝莱斯芽孢杆菌LF01基因组序列分析及其代谢产物的生防作用
张德锋, 高艳侠, 可小丽, 王亚军, 任燕, 石存斌
 doi: 10.11964/jfc.20201012442
[摘要](696) [HTML 全文](279) [PDF 3542KB](11)
摘要:
为充分挖掘贝莱斯芽孢杆菌LF01菌株拮抗物质合成相关基因簇,本研究对其进行了全基因组测序与分析,同时评价了LF01菌株拮抗物质的生物安全性及其生防作用效果。基于三代Nanopore测序平台对LF01菌株进行全基因组测序分析,并利用在线ANI和DDH分析以及基因组遗传进化确定该菌株的分类学地位;通过antiSMASH在线分析LF01基因组中的拮抗物质合成基因簇。同时,基于CAZyme数据库分析LF01菌株对糖类物质的水解能力。LF01菌株拮抗物质通过腹腔注射的方式,评价其对尼罗罗非鱼和斑马鱼的致病性;拮抗物质饲喂尼罗罗非鱼后评价其生防作用效果。结果显示,LF01菌株基因组全长为3 974 023 bp,GC含量为46.56%,包含3 843个编码基因。LF01菌株与贝莱斯芽孢杆菌的ANI和DDH分别≥97.66%和≥80.10%,同时基于SNP进化分析显示,该菌与贝莱斯芽孢杆菌聚为一支,表明LF01菌株在基因组分子水平上被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌。LF01菌株包含了bacillaene、bacillibactin、杆菌霉素D(bacillomycin D)、溶杆菌素(bacilysin)、difficidin、泛革素(fengycin)、macrolactin H、plantazolicin和表面活性素(surfactin)等9个拮抗物质基因簇,约占基因组全长的8.83%。LF01菌株基因组中含有许多与纤维素、半纤维素、淀粉、几丁质、果胶、肽聚糖和葡聚糖降解有关的CAZy酶基因家族。LF01的拮抗物质对尼罗罗非鱼和斑马鱼具有较高的安全性,而且饲喂尼罗罗非鱼后能够显著提高其对无乳链球菌的抗病力。综上可知,LF01菌株含有大量拮抗物质合成基因簇,其拮抗物质具有较高的生物安全性,并且饲喂后能够显著提高尼罗罗非鱼的抗病力,表明LF01菌株拮抗物质用于水产动物细菌病的防控具有良好的开发应用前景。
体外培养条件下三角帆蚌胚胎早期发育观察及胚胎发育生物学零度和有效积温分析
胡宏辉, 白志毅, 郭思鹏, 冯上乐, 孙田洋, 陈卫民
 doi: 10.11964/jfc.20201212524
[摘要](0) [HTML 全文](0) [PDF 1282KB](0)
摘要:
为了探寻三角帆蚌胚胎体外培养方法,本实验以解剖获得的雌雄配子为材料,使用与三角帆蚌体液等渗的平衡盐溶液(BSS)进行人工体外受精和体外培养,观察各阶段胚胎的形态特征,并分析计算不同胚胎发育阶段的生物学零度和有效积温。结果显示,在温度为(25±1) °C的BSS培养条件下,受精卵发育至第二极体排放、二细胞期、四细胞期、八细胞期、十六细胞期和桑椹期的时间分别为1.8 、2.8 、5.6 、10.5 、13.9和17.3 h,胚胎最长发育至桑椹期后停止发育。另外,池塘平均水温分别为26.5 °C、28.1 °C和29.2 °C时,三角帆蚌胚胎发育至成熟钩介幼虫分别需要10、9和8 d,计算得出三角帆蚌胚胎发育的生物学零度为14.81 °C,根据生物学零度计算胚胎发育至卵裂期、囊胚期、原肠期、膜内钩介幼虫期和成熟钩介幼虫的有效积温分别为12.95 °C×d、25.99 °C×d、42.27 °C×d、69.21 °C×d和118.14 °C×d。研究结果初步尝试对三角帆蚌受精卵进行体外培养,并根据胚胎发育水温和时间获得三角帆蚌早期胚胎发育的生物学零度和有效积温,可为突破三角帆蚌全人工繁育技术奠定基础,对淡水贝类现代生物育种技术研发和种质资源保护具有重要意义。
亚硝态氮胁迫下凡纳滨对虾体内亚硝态氮的积累与能量代谢响应
李忠帅, 马甡, 单洪伟, 王腾, 肖威
 doi: 10.11964/jfc.20201112474
[摘要](591) [HTML 全文](254) [PDF 7585KB](20)
摘要:
为探究亚硝态氮胁迫下凡纳滨对虾[体长为(6.8±0.3) cm,体质量为(4.0±0.6) g]体内亚硝态氮的时空分布与能量代谢相关酶活性的响应,实验设置0(对照组)、0.8、4.0和8.0 mmol/L 4个处理组,进行持续96 h的亚硝态氮胁迫实验和12 h的恢复实验。结果显示,凡纳滨对虾死亡率与胁迫浓度呈现显著的正相关性。胁迫6 h内,亚硝态氮在凡纳滨对虾鳃、血淋巴、肠道、肝胰腺和肌肉组织中明显积累,且积累量与胁迫浓度呈现正相关。相同胁迫浓度组,亚硝态氮在对虾鳃中积累最多,肌肉中最少,鳃的积累量约为肌肉的3倍。Na+-K+-ATP酶活性在0.8和4.0 mmol/L组对虾肝胰腺和肌肉中显著升高,而在8.0 mmol/L组的肌肉中显著降低。胁迫各组对虾肝胰腺AMPK活性显著上升,且与胁迫浓度呈现正相关性。恢复期间,除血淋巴(8.0 mmol/L组)外,各组织亚硝态氮1 h恢复效率均超过50%,且肝胰腺和鳃的恢复效率最高,达到74%以上。血淋巴、鳃、肠道中亚硝态氮恢复到对照组水平的时间最短,均在6 h以内,而水体中亚硝态氮含量显著升高。以上研究表明,胁迫下亚硝态氮会在对虾组织中迅速积累,并引起能量代谢进程的加快;胁迫解除后,积累在体内的亚硝态氮能够迅速排出体外,以减轻毒性影响。本研究结果将为缓解亚硝态氮对养殖对虾毒性效应的研究提供参考。
传染性造血器官坏死病灭活疫苗的制备及免疫保护效果分析
陈桂花, 徐黎明, 赵景壮, 任广明, 邵轶智, 卢彤岩
 doi: 10.11964/jfc.20210512833
[摘要](0) [HTML 全文](0) [PDF 3427KB](0)
摘要:
为了研发用于预防传染性造血器官坏死病(infectious hematopoietic necrosis,IHN)灭活疫苗,实验以不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)在胖头鱥上皮细胞(Epithelioma papulosum cyprinid,EPC)上对传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)进行连续传代培养,通过测定各代病毒滴度,结合病毒收获时间确定最佳增殖方案;采用不同浓度的β-丙内酯(β-propanolactone,BPL)在24 °C下灭活,经安全性试验验证后确定最佳灭活条件。以不同剂量腹腔注射免疫虹鳟,以磷酸盐缓冲溶液(PBS)为阴性对照组,通过检测攻毒后相对免疫保护率(relative percent survival,RPS)、免疫相关因子表达量及血清中和抗体效价来分析该疫苗的保护效果。结果显示,最佳增殖方案为以MOI为0.000 1接种,15 °C培养3 d;最佳灭活条件为以终浓度3.0 mmol/L的BPL将IHNV在24 °C下灭活24 h;以最佳免疫剂量10 μL/尾腹腔注射免疫虹鳟,免疫后7、21、45、60 d的相对免疫保护率分别为91.37%、84.28%、84.15%和47.5%,免疫后60 d时RPS显著低于其他时间点免疫组;免疫相关基因的实时荧光定量PCR(realtime quantitative PCR,RT-qPCR)结果显示,与阴性对照组相比,Mx-1和IFN-γ表达量在免疫后7、15、30 d脾脏和头肾中均显著上调,在第7天时达到最大值(5倍);CD4和IgM表达量在免疫后15 d脾脏和头肾中均显著上调;在免疫后第30、45、60天虹鳟血清IHNV中和抗体效价依次为67.25、43.4和29.78,呈下降趋势且各组间差异显著。研究表明,该灭活疫苗可诱导虹鳟产生特异性免疫和非特异性免疫反应,对虹鳟具有显著的免疫保护作用。本研究为IHNV灭活疫苗研发提供参考。
日粮海带酶解提取物对斑点叉尾鮰生长和肝脏转录组表达的影响
吕昊, 叶元土, 易皓明, 孙飞, 石瑶瑶, 吕斌, 周伟, 蒋蓉
 doi: 10.11964/jfc.20201012436
[摘要](0) [HTML 全文](0) [PDF 1622KB](0)
摘要:
为研究饲料中海带酶解提取物对斑点叉尾鮰生长和肝脏转录组的影响,在日粮中分别添加0 g/kg (S,对照组)、0.3 g/kg (KP3)、0.5 g/kg (KP5)、1.0 g/kg (KP10)、1.5 g/kg (KP15)、2.0 g/kg(KP20)的海带酶解提取物,以初始体质量为(51.18±1.14) g的斑点叉尾鮰为实验对象,随机分为6组,每组3个重复,每个重复40尾鱼,在池塘网箱中养殖60 d。结果显示:① 与对照组(S)相比,饲料添加海带酶解提取物对斑点叉尾鮰的存活率(SR)没有显著影响,特定生长率(SGR)提高了1.20%~5.39%,饲料系数(FCR)降低了1.65%~9.09%;分别以SGR和FCR为目标进行二次多项式回归分析,得到海带酶解提取物在饲料中的最适添加量分别为0.98和0.93 g/kg;KP10~KP20组肥满度(CF)和脏体比(VSI)显著降低,KP10组肝体比(HSI)显著降低;各组全鱼的水分、粗脂肪、粗蛋白质和粗灰分含量差异不显著。② KP3组肠道皱襞高度,KP5组肠道皱襞高度、宽度、肌层厚度,KP10组的皱襞宽度均显著高于S组。③选取S组与KP10组鱼肝脏提取总RNA后进行转录组测序和基因差异表达分析,表达显著下调的基因数有81个,显著上调的有199个;GO功能分类分析结果显示,差异表达基因(DEGs)被注释到DNA转录、金属离子结合、膜及膜组成成分等条目上;KEGG pathway分析结果显示,DEGs主要富集到细胞增殖与分化、激素调控、脂类代谢、糖类代谢以及生长因子代谢等相关的12个显著差异代谢通路。研究表明,日粮添加海带酶解提取物可以促进斑点叉尾鮰生长,降低饲料系数,改善肠道形态结构,加强肝脏的糖脂代谢能力,适宜添加量为0.93~0.98 g/kg。
影响中国沿海刺网网具遗失率的因子
宋利明, 陈明锐, 丁睿智, 王迪, 周旺, 李轶婷
 doi: 10.11964/jfc.20200512272
[摘要](0) [HTML 全文](0) [PDF 1360KB](0)
摘要:
为掌握影响我国沿海刺网渔船网具遗失率 (RG) 的因子及其程度,对中国沿海渔民开展了问卷调查。利用调查数据,结合GAM模型分析了影响我国刺网渔船网具遗失率的因子及其程度。结果显示,(1)影响我国沿海刺网渔船网具遗失率的因子(解释偏差)为:单航次天数(86.8%)、年作业天数(4.2%)、单航次渔具携带重量(2.8%)、作业水深(2.4%)、渔船吨位(0.9%)和年均渔具采购数量(0.1%);(2)GAM模型能用于研究渔船网具遗失率和影响因子之间的关系;(3)随着单航次天数和年作业天数的增加,RG呈上升的趋势;(4)随着作业水深的增加、单航次渔具携带重量超过18000 kg时,RG呈下降趋势。建议采取以下措施以降低刺网渔船网具遗失率:(1)单航次天数不得超过30 d,减少年作业天数;(2)根据渔船的吨位,确保网具单航次携带重量在18000 kg以上;(3)根据刺网渔具的高度规定作业水深和作业渔区;(4)渔船总吨位控制在200 t以内。
饲料中添加脱氧胆酸钠对大口黑鲈生长、糖代谢及肠道菌群的影响
周楠楠, 丁斐斐, 张乐, 乔芳, 杜震宇, 张美玲
 doi: 10.11964/jfc.20210312665
[摘要](151) [HTML 全文](56) [PDF 7788KB](6)
摘要:
为了评估脱氧胆酸钠作为大口黑鲈饲料添加剂的作用效果,实验配制了脱氧胆酸钠添加量分别为0 (对照组)和300 mg/kg的2种实验饲料,饲养初始体质量为 (10.80±0.12) g的大口黑鲈8周后,分析了脱氧胆酸钠对大口黑鲈生长、代谢以及肠道菌群的影响。结果显示,脱氧胆酸钠显著增加了大口黑鲈的终末体质量、体长和肥满度(CF),而对脏体比(VSI)、肝体比(HSI)、全鱼的总脂肪和粗蛋白含量无显著影响;脱氧胆酸钠显著增加了肝脏和肌肉中糖异生相关基因的表达,同时脱氧胆酸钠通过增加肌肉中糖原合成酶(GCS)的活性显著增加了肌肉中糖原的含量,而对肝脏中的糖原含量则无显著影响。此外,脱氧胆酸钠显著增加了胆囊中胆汁酸的含量,结果发现,脱氧胆酸钠主要通过下调肝脏中胆汁酸受体基因(fxr)的表达,以及上调胆固醇合成酶7α-羟化酶基因(cyp7a1)的表达,促进胆汁酸的合成。大口黑鲈摄食含脱氧胆酸钠的饲料后,肠道中厚壁菌门和拟杆菌门的微生物丰度下降,放线菌门的丰度升高。研究表明,脱氧胆酸钠作为饲料添加剂可以促进大口黑鲈的生长、肌糖原的积累以及胆汁酸合成的增加,并会对肠道菌群组成产生影响。因此,脱氧胆酸钠可以作为大口黑鲈的一种饲料添加剂,研究成果将为进一步扩展胆汁酸盐在水产养殖中的应用提供重要的理论基础。
饲用枯草芽孢杆菌HGcc-1对鲤肠肝健康、血清补体及肠道菌群的影响
胡娟, 高辰辰, 药园园, 郝强, 周伟, 冉超, 周志刚, 杨雅麟, 张震
 doi: 10.11964/jfc.20210312697
[摘要](80) [HTML 全文](57) [PDF 2873KB](7)
摘要:
为了研究枯草芽孢杆菌HGcc-1对鲤肠肝健康、血清补体和肠道菌群的影响,实验选择体质量为(13.10±0.39) g健康鲤,随机分为HGcc-1添加组和对照组,养殖20周后测定生长指标,用试剂盒检测了鲤血清内毒素(LPS)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总补体和溶菌酶,并对肠道菌群进行了16S rRNA测序,同时将添加组和对照组的肠道菌群转接至无菌斑马鱼,然后检测无菌斑马鱼体内毒素结合蛋白 (LBP)、ALT、AST的水平和C3、C4基因表达量;最后还检测了HGcc-1直接作用于无菌斑马鱼时,无菌斑马鱼的ALT、AST的水平和C3、C4基因表达量。结果显示,HGcc-1对鲤的增重率无显著影响;与对照组相比,饲料中添加HGcc-1显著降低鲤血清内毒素、ALT和AST水平;同时HGcc-1添加组血清总补体水平显著升高。在门水平上,HGcc-1添加组中梭杆菌门丰度比对照组增加了47.1%;变形菌门丰度比对照组减少了70.7%;在属水平上,HGcc-1添加组中鲸杆菌属(的丰度比对照组增加了47.1%;柠檬酸杆菌属和气单胞菌属(的丰度比对照组分别减少了56.6%和70.9%。利用无菌斑马鱼模型进一步发现,HGcc-1添加组鲤肠道菌群显著降低了无菌斑马鱼LBP含量和AST水平,显著上调了无菌斑马鱼补体C3和C4基因表达;与此同时,HGcc-1与无菌斑马鱼直接互作也降低了鱼体ALT和AST水平。研究表明,饲料中添加枯草芽孢杆菌HGcc-1能够改善鲤肠肝健康、血清补体以及肠道菌群稳态。本研究为枯草芽孢杆菌HGcc-1的下一步应用奠定了理论基础。
黄曲霉毒素B1对黄颡鱼幼鱼生长及肝脏功能的影响
钟蕾, 王子琴, 王金龙, 夏立秋, 陈丽媛, 周建成, 胡毅
 doi: 10.11964/jfc.20201212564
[摘要](160) [HTML 全文](78) [PDF 2961KB](5)
摘要:
为研究黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1, AFB1)对黄颡鱼幼鱼生长、肠道消化酶及肝脏功能的影响,用添加不同梯度黄曲霉毒素B1(AFB1)(0、50、100和200 μg/kg)的4种等氮等脂配合饲料饲喂初始体质量为(6.00±0.10) g的黄颡鱼幼鱼8周。结果显示:① 饲料中添加AFB1对黄颡鱼幼鱼的存活率、饲料系数和特定生长率等均无显著影响,但使胰蛋白酶活性显著提高,而高含量AFB1(100和200 μg/kg)显著降低肠道淀粉酶和脂肪酶活性;② 随着AFB1添加量的上升,血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性及葡萄糖、甘油三酯、总胆汁酸和总胆固醇含量显著升高,肝脏中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性显著下降;③ AFB1添加组的肝脏过氧化氢酶活性和丙二醛含量显著高于对照组,100和200 μg/kg AFB1组超氧化物歧化酶活性显著高于对照组,其余各组无显著差异;④ AFB1添加组肝脏sod基因及炎性因子il-1β基因的相对表达量显著上调,200 μg/kg AFB1组cat基因及炎性因子il-8、il-10相对表达量显著上调;⑤ 通过组织学观察,AFB1会引起部分肝细胞出现轻微萎缩、肝细胞核移位、细胞界限模糊和肝细胞内空泡化的现象。研究表明,在本实验条件下,饲料中AFB1含量低于200 μg/kg不影响黄颡鱼幼鱼生长性能,但饲料中AFB1≥50 μg/kg时会影响黄颡鱼幼鱼肠道的消化吸收功能,同时引起肝脏氧化应激及炎性反应,造成肝脏功能损伤。
不同水温与饲料磷水平对日本沼虾生产性能、组织及水体磷含量的影响
孙淼, 何超凡, 张玲, 蒋广震, 刘文斌, 李向飞
 doi: 10.11964/jfc.20201212554
[摘要](212) [HTML 全文](90) [PDF 2629KB](7)
摘要:
为探讨不同水温与饲料磷水平对日本沼虾生产性能、组织及水体磷含量的影响,实验采用3×3因子设计,设定3个水温梯度(20、25和30 °C)和3个饲料磷水平(1.1%、1.5%和1.9%),共9组(分别命名为20/1.1、20/1.5、20/1.9、25/1.1、25/1.5、25/1.9、30/1.1、30/1.5和30/1.9),每组4个重复。虾饲养于室内循环系统中,养殖期为8周。结果显示,从水温来看,30 °C组的终末体质量、特定生长率和增重率均显著高于20 °C组,但与25 °C组间差异不显著,而摄食量和饵料系数的变化趋势与此相反。此外,30 °C组的磷保留率显著高于其他2组,且该组血淋巴磷含量显著高于25 °C组,而与20 °C组无显著差异。从饲料磷水平来看,1.9%磷水平组的终末体质量、增重率和磷保留率显著低于其他2组,而磷摄入量与饵料系数的变化趋势与之相反。1.9%磷水平组的特定生长率显著低于1.5%磷水平组,但与1.1%磷水平组差异不显著。此外,1.1%磷水平组全虾磷含量显著低于其他2组,且该组的血淋巴钙含量显著高于1.9%磷水平组,而与1.5%磷水平组无显著差异;1.5%磷水平组血清碱性磷酸酶活性显著高于1.1%磷水平组,但与1.9%磷水平组间无显著差异。水温和饲料磷水平之间的交互作用显著影响摄食量、磷摄入量、磷保留率、血淋巴磷含量及碱性磷酸酶活性,峰值分别发现于20/1.1、25/1.9和30/1.9、30/1.1、30/1.9及25/1.5组。另外,水体磷含量随时间延长显著升高,而20/1.5组水体磷含量极显著高于25/1.1组和30/1.1组。研究表明,当水温为30 °C而饲料磷水平为1.1%时,日本沼虾的生长性能及饲料效率最优,同时其对水体中磷的排放量也较低。
锌对凡纳滨对虾生长、非特异性免疫指标、抗病力及肠道菌群结构的影响
何树青, 李日美, 杨奇慧, 谭北平, 董晓慧, 迟淑艳, 章双, 刘泓宇
 doi: 10.11964/jfc.20200712355
[摘要](159) [HTML 全文](65) [PDF 3229KB](7)
摘要:
为研究不同锌水平对凡纳滨对虾生长、非特异性免疫指标、抗病力以及肠道菌群结构的影响,以七水合硫酸锌(ZnSO4·7H2O)作为本实验的锌源,在对虾基础饲料中分别添加0(对照组)、20、40、60、80、100、150 mg/kg有效锌配制成7种等氮等脂饲料,分别投喂初始体质量为(0.45±0.01) g的健康凡纳滨对虾幼虾8 w。结果显示:① 随着饲料中锌水平的提高,对虾增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、存活率(SR)和蛋白质效率(PER)呈先上升后下降的趋势,饲料系数(FCR)呈先下降后上升的趋势。其中60 mg/kg组WGR和SGR均显著高于对照组;80 mg/kg组FCR最低,PER和SR最高,均显著优于对照组。② 80~150 mg/kg组对虾体粗脂肪含量显著高于对照组;40~80 mg/kg组对虾体粗灰分含量显著高于对照组。③ 40~150 mg/kg组对虾血清总蛋白(TP)、总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)含量均显著高于对照组。④ 饲料中添加锌提高了血清超氧化物歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)、碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)活性及总抗氧化能力(T-AOC),同时显著降低了血清中的丙二醛(MDA)含量,表明锌可改善凡纳滨对虾的非特异性免疫功能。⑤ 在人工急性感染哈维氏弧菌的实验中,随着锌水平的提高,对虾存活率呈先上升后下降的趋势,锌添加组存活率均显著高于对照组,且80 mg/kg组存活率最高,抗病力最强。⑥ 在对虾肠道物种多样性分析中,40和100 mg/kg组对虾肠道有效OTU数目显著高于对照组。随着锌水平的增加,Ace指数和Chao1指数均显著提高,而Shannon指数和Simpson指数无显著变化。研究表明,在本实验条件下,添加适宜水平的锌可促进凡纳滨对虾幼虾的生长、提高抗病力;当饲料中缺乏锌时,对虾的生长和抗病力较差;而过量的锌在一定程度上抑制了对虾的生长,但未出现不良病症。以增重率作为评价指标,饲料中添加94.46 mg/kg锌可显著改善凡纳滨对虾幼虾的生长;以抗病力作为评价依据,凡纳滨对虾幼虾饲料中锌的最适添加量为80 mg/kg。
棉籽蛋白源对大口黑鲈生长、体组成及健康的影响
周兴梅, 何光伦, 许志城, 陈拥军, 谭北平, 林仕梅
 doi: 10.11964/jfc.20210412748
[摘要](110) [HTML 全文](65) [PDF 3238KB](3)
摘要:
为评价棉籽蛋白在大口黑鲈饲料中应用的可行性,用4种不同质量的棉籽蛋白替代30%鱼粉配制成5种等氮等脂的实验饲料(CPC0为对照组,CPC1,CPC2,CPC3,CPC4),在室内循环养殖系统饲喂大口黑鲈[平均体质量(12.20±0.11) g] 8周。结果显示,4种棉籽蛋白的营养组成、棉酚、棉籽糖和水苏糖含量不同,以CPC3棉籽蛋白质量最优。CPC3组鱼的终末体质量、增重率和特定生长率显著高于其他组,而各实验组全鱼常规营养成分和肌肉氨基酸组成没有显著差异。CPC3组肝脏SOD、GSH-PX活性以及CATSOD mRNA表达水平最高,MDA含量最低。CPC3组肝脏抗炎因子IL-10、TGF-β的相对表达量最高,而促炎因子IL-1βIL-8和TNF-α的相对表达量最低。此外,棉籽蛋白源会显著影响大口黑鲈肝脏蛋白质代谢,CPC3组ALT、AST活性以及基因P13KAKTm-TORS6K14E-BP表达水平最高。同时发现,CPC3组大口黑鲈肠道SOD酶活性最高、MDA含量最低,且肠道通透性指标(二胺氧化酶、D-乳酸和内毒素)也最低。棉籽蛋白源也影响了肠道紧密连接蛋白相关基因ZO-1、Claudin-1和Occludin的表达。研究表明,棉籽蛋白质量对大口黑鲈生长和健康会产生显著影响,其中棉籽蛋白CPC3效果最佳,显著改善大口黑鲈的肝脏和肠道健康,进而促进其生长。因此,棉籽蛋白CPC3可以作为大口黑鲈饲料的优质蛋白源。
大口黑鲈幼鱼对饲料中锌的需求量
宋博文, 杨航, 李小勤, 王璞, 何明, 徐禛, 杨品贤, 冷向军
 doi: 10.11964/jfc.20200912393
[摘要](106) [HTML 全文](55) [PDF 2971KB](3)
摘要:
为确定大口黑鲈幼鱼对饲料锌的适宜需求量,以酪蛋白、明胶和鱼粉为主要蛋白质源,以ZnSO4·H2O为锌源制作半精制基础饲料,分别向基础饲料中添加0、25、50、100和200 mg/kg锌,制成5种含不同锌水平的饲料(24.8、48.8、78.9、126.1和223.6 mg/kg干物质)(分别命名为Zn-25、Zn-49、Zn-79、Zn-126和Zn-224),投喂初始体质量为(10.99 ± 0.07) g的大口黑鲈幼鱼8周。结果显示,饲料中补充25 mg/kg锌(Zn-49)显著提高了大口黑鲈增重率,降低了饲料系数,进一步提高锌的添加量后,各组增重率和饲料系数趋于稳定。当饲料锌含量为25~49 mg/kg时,T-SOD和CuZn-SOD活性增加,锌含量达到49 mg/kg后,其活性保持基本稳定,而AKP活性在Zn-79组最高。大口黑鲈全鱼和脊椎骨中的锌含量随饲料中锌含量的增加而上升,当饲料锌含量达到126 mg/kg (Zn-126)后,全鱼和脊椎骨中的锌含量不再显著增加,而全鱼铁、骨铁、骨锰含量和全鱼铁、锌沉积率则随饲料锌含量的增加而下降。研究表明,在半精制饲料中补充锌可以显著改善大口黑鲈的生长和饲料利用,提高血清免疫能力、全鱼锌和骨锌的沉积,以增重率、饲料系数、全鱼锌和骨锌为指标,基于折线模型确定大口黑鲈幼鱼对饲料中锌的需求量分别为45.5、44.6、121.8和130.5 mg/kg干物质。
团头鲂PGC1α分子特征及其对营养限制、高糖饲料和葡萄糖负荷的响应
丁志荣, 李向飞, 刘文斌, 谢帝芝, 徐超, Jean-JacquesYao Adjoumani
 doi: 10.11964/jfc.20201212543
[摘要](137) [HTML 全文](40) [PDF 3041KB](3)
摘要:
为探究过氧化物酶体增殖活化受体 γ辅激活因子1α (peroxisome proliferator activated receptor γ coactivator 1α,PGC1α)基因在团头鲂糖代谢中的作用,实验从团头鲂肝脏中克隆获得了PGC1α基因的片段序列,并对其开展了生物信息学分析;同时研究了饥饿、高糖(糖水平:45%)饲料及葡萄糖负荷对团头鲂脑和肝脏PGC1α表达的影响。结果显示,获得的团头鲂PGC1α基因cDNA 片段长为2 566 bp,其中包含1 404 bp的开放阅读框并编码467个氨基酸,与草鱼的同源性为96.79%;与正常投喂组相比,饥饿10 d组鱼脑和肝脏中PGC1α的mRNA水平显著升高,饥饿再投喂1 h后恢复至对照组的表达水平。饲喂高糖饲料(12周)后,与对照组相比,鱼脑和肝脏中PGC1α的mRNA水平显著降低。此外,葡萄糖负荷后,脑和肝脏中PGC1α的mRNA水平在2 h内显著降低至最小值,随后逐渐升高至基础水平。研究表明,PGC1α在团头鲂糖代谢过程中可能发挥重要作用。
饲料不同钙磷比对三疣梭子蟹幼蟹生长性能、矿物质沉积和能量代谢的影响
赵明明, 袁野, 金敏, 罗嘉翔, 王学习, 胡潇颖, 程鑫, 时博, 焦乐飞, 周歧存
 doi: 10.11964/jfc.20201212536
[摘要](128) [HTML 全文](43) [PDF 3615KB](0)
摘要:
为研究饲料中不同钙磷比对三疣梭子蟹幼蟹生长性能、血清生化、矿物质沉积和能量代谢的影响,配制5种等氮等脂(46%粗蛋白和7%粗脂肪)钙磷比分别为1.00∶2.00、1.00∶1.50、1.00∶1.00、1.00∶0.75和1.00∶0.50的实验饲料。选择初始体质量为(12.82±0.37) g的梭子蟹150只,随机分成5组(每组3个重复,每个重复10只),进行为期8周的养殖实验。结果显示,钙磷比为1.00∶1.00和1.00∶0.75的饲料,其特定生长率(SGR)和饲料效率(FER)显著高于其他组。钙磷比为1.00∶0.50饲料组幼蟹血淋巴的谷草转氨酶(GOT)显著高于其他组,碱性磷酸酶(AKP)和谷丙转氨酶(GPT)活性随着饲料钙磷比的增加呈上升的趋势。幼蟹肝胰腺、肌肉和甲壳中的磷含量随着钙磷比的升高呈下降的趋势,且钙磷比1.00∶2.00组幼蟹磷含量显著高于1.00∶0.50组。钙磷比1.00∶1.50和1.00∶1.00组幼蟹肝胰腺ATP含量显著高于其他饲料组。幼蟹肝胰腺己糖激酶(HK)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性随饲料钙磷比的升高呈先升高后下降的趋势,当钙磷比为1时,梭子蟹肝胰腺的HK和SDH酶活性最高。此外,钙磷比1.00∶1.00组显著上调了梭子蟹肝胰腺电子传递链相关基因(nd1、sdhccytbcox Ⅱ)的表达水平,当钙磷比为1.00∶0.75时,显著上调了幼蟹肝胰腺线粒体能量代谢相关基因(ATPase6、sirt3和nrf1)的表达量。研究表明,本实验条件下,以增重率为评价指标,通过回归模型得到梭子蟹最适钙磷比为1.06~1.26,在此范围内能促进三疣梭子蟹幼蟹的生长、维持组织的最适磷沉积以及很好地促进能量的产生。
3种乳酸菌对乌鳢生长、抗氧化及免疫功能的影响
孔雨昕, 田佳鑫, 彭思博, 王桂芹
 doi: 10.11964/jfc.20200912403
[摘要](113) [HTML 全文](46) [PDF 5797KB](6)
摘要:
为研究3种乳酸菌对乌鳢生长、抗氧化及免疫功能的影响,实验选用初始体质量为(3.43 ± 0.05) g的乌鳢360尾,随机分成4组,每组设3个重复,每个重复30尾鱼。分别投喂基础饲料和添加了108 CFU/g的乳酸乳球菌L21(L21组)、植物乳杆菌W21(W21组)、粪肠球菌L2(L2组)的实验饲料,8周后,采集乌鳢血清、肝脏、脾脏、肾脏和肠道,以检测相关指标以及基因表达水平的变化。结果显示,与对照组相比,饲料中添加的3种乳酸菌均可显著提高乌鳢的平均增重率(AWGR)、特定生长率(SGR)及饲料效率(FER),其中L21组显著高于其他各组。与对照组相比,L2组超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)及碱性磷酸酶(AKP)活性显著高于对照组,W21和L2组溶菌酶(LZM)活性显著高于对照组,各组免疫球蛋白M(IgM)活性均不显著。各组织中IL-1βIL-8IL-10TNF-α基因表达水平均有不同程度升高,乳酸菌对肠道中免疫相关基因表达均有显著的促进作用。研究表明,本实验条件下,乳酸乳球菌L21对乌鳢的应用效果最好,能够提高乌鳢的生长性能、饲料利用及免疫基因表达,但对血清抗氧化能力并无显著影响。
日粮中裂殖壶藻油配伍外源性EPA对草鱼幼鱼脂肪酸组成、FAD、ELO基因表达及脂质代谢的影响
邢君霞, 吉红, 李汉东, 肖芬芬, 袁想通
 doi: 10.11964/jfc.20200912417
[摘要](95) [HTML 全文](49) [PDF 2721KB](5)
摘要:
摄食含有裂殖壶藻硬脂油日粮的草鱼可能通过节省DHA合成所需的能量和促进脂解作用供应能量以减少蛋白质分解的共同作用下,刺激蛋白质沉积,获得比摄食鱼油更好的生长效果。为探究草鱼日粮中应用富含DHA的裂殖壶藻硬脂油后是否需要配伍EPA及其可能机制,实验配制5组等氮等能日粮饲养草鱼[(22.70 g±0.80) g]49 d,分别以鱼油(F-O);藻油硬脂(S-O);藻油硬脂(DHA)∶EPA=3∶2(SE1-O);藻油硬脂(DHA)∶EPA=1∶1(SE2-O);EPA(E-O)提供5组饲料中的0.52% n-3长链多不饱和脂肪酸(LC PUFA)。结果显示: ① 增重率(WG)、特定生长率(SGR)及饲料系数(FCR)在各组间均无差异;② S-O组肌肉粗蛋白含量显著高于E-O组;③ S-O组肌肉DHA含量显著高于F-O组、SE1-O组和E-O组;④ 动脉粥样硬化指数在各组间无显著差异,SE2-O组血栓形成指数显著高于F-O组,S-O组和SE2-O组胆固醇血症指数显著低于F-O组;⑤ E-O组的腹腔脂肪细胞显著大于F-O组和SE1-O组,且甘油三酯水解酶(ATGL)和肉碱棕榈酰转移酶(CPT1)转录水平显著下调;肌肉中的脂肪酸去饱和酶(FAD)转录水平在E-O组显著高于S-O组,脂肪酸延长酶(ELO)转录水平在S-O组显著下调。研究表明,裂殖壶藻油单独或配伍EPA使用对草鱼生长、n-3 LC PUFA含量及脂肪组织水解无显著影响。仅以EPA为n-3 LC PUFA来源时,会减弱脂肪组织的水解并降低肌肉粗蛋白的含量。日粮中高水平的DHA会减弱机体合成LC PUFA的能力。相对于EPA,草鱼可能更需要DHA,生产中可以单独使用裂殖壶藻油,而无需配伍EPA。
鳜养殖概况及摄食调控机制研究进展
李松林, 韩志豪, 王小源, 陈乃松
 doi: 10.11964/jfc.20200812371
[摘要](691) [HTML 全文](377) [PDF 2579KB](82)
摘要:
鳜是我国名贵的淡水经济鱼类,2019年其养殖产量已达33万t。本文从养殖现状、养殖模式及良种选育等方面介绍鳜的养殖概况。同时,鳜摄食习性独特,终生以活鱼为食。养殖生产中,主要以活饵料鱼直接饲喂,这种以鱼养鱼的方式不仅资源利用率低,对环境和资源的破坏也极大。据此,本文从环境因素和饵料性质等方面概述了影响鳜摄食的外在因素,并从摄食感觉器官和摄食调控因子剖析鳜摄食特性的内在因素,这有助于通过人工干预的方式调整鳜的摄食习性,为其转食配合饲料提供必要的支撑。此外,需加强鳜摄食调控机制及营养生理需求特性的研究,实现鳜配合饲料的突破,促进其养殖业的绿色健康发展。
宠物级鸡肉粉替代鱼粉的饲料中补充苏氨酸对大口黑鲈生长性能、糖脂代谢和免疫的影响
许钰珏, 王文强, 杨鹏, 何超群, 覃雅雯, 宋飞
 doi: 10.11964/jfc.20201112498
[摘要](242) [HTML 全文](87) [PDF 2714KB](6)
摘要:
为研究饲料中不同苏氨酸水平对大口黑鲈生长性能、糖脂代谢、免疫及宠物级鸡肉粉利用率的影响,实验采用初始体质量为(4.16±0.06) g的大口黑鲈作为研究对象,设计3种等氮等脂的饲料:苏氨酸对照组(TC,65.0%鱼粉),低水平苏氨酸组(LT,65.0%宠物级鸡肉粉添加除苏氨酸以外的必需氨基酸含量至TC水平组)和苏氨酸添加组(TS,LT组添加苏氨酸含量至TC水平组),养殖实验开展8周。实验结果显示,与对照组相比,LT处理组饲料显著降低了大口黑鲈的生长性能、饲料效率和鱼体营养物质组成,饲料中添加苏氨酸可在一定程度上改善宠物级鸡肉粉完全替代鱼粉后导致的生长性能受限、饲料效率低下和鱼体营养物质组成降低等问题。宠物级鸡肉粉完全替代鱼粉还显著降低了血浆中营养成分和多种游离氨基酸的含量,饲料中添加晶体苏氨酸能够显著提高血浆中游离氨基酸的水平,使之与对照组间无显著性差异。mRNA水平上,饲料中添加苏氨酸可显著改善鸡肉粉完全替代鱼粉引起的肝脏中糖脂合成代谢抑制和分解代谢加剧的现象,同时添加苏氨酸也可显著降低细胞炎症因子的mRNA的表达水平。研究表明,饲料中适量苏氨酸的添加可在一定程度上提高大口黑鲈的生长性能、促进脂肪合成和抑制脂肪分解,并增强其免疫机能。
温度和摄食率对鲈鲤幼鱼摄食代谢特征的影响
蒲德永, 丁雨箫, 刘小红, 蒲应媚, 辜浩然, 何兴恒, 吴毅, 王志坚
 doi: 10.11964/jfc.20200912390
[摘要](220) [HTML 全文](72) [PDF 7726KB](6)
摘要:
为了研究不同温度和摄食率对鲈鲤幼鱼摄食代谢特征的影响,在15和25 °C条件下驯化4周后,以泥鳅块为饵料,按不同的摄食率(15 °C下摄食率为1%、2%和4%体质量,25 °C下摄食率为1%、2%、4%和6%体质量)投喂实验鱼[体质量(38.35±0.49) g,体长(14.22±0.10) cm],随后测定其耗氧率并计算其摄食代谢相关参数。结果显示,在相同的摄食率下,25 °C驯化组静止代谢率、摄食代谢峰值、特殊动力作用(SDA)总耗能和SDA系数都显著高于15 °C驯化组;25 °C驯化组在2%和4%摄食率下的SDA时间显著小于15 °C驯化组。在25 °C驯化组中,4%摄食率组的代谢峰值、峰值比率、SDA时间和SDA总耗能都显著高于1%和2%摄食率组,但是显著低于6%摄食率组,4%和6%摄食率组的峰值时间显著高于1%和2%摄食率组,2%、4%和6%摄食率组的SDA系数显著低于1%摄食率组;在15 °C驯化组中,4%摄食率组代谢峰值、峰值比率、SDA时间和SDA总耗能都显著高于1%和2%摄食率组,各个摄食率组的峰值时间和SDA系数没有显著性差异。研究表明,相比于低温条件,25 °C水温条件可能更有利于鲈鲤幼鱼对食物的快速消化和吸收;随着摄食率的增加,鲈鲤幼鱼通过代谢峰值的增加和SDA时间的延长来满足其SDA耗能增加的需求。本研究结果为鲈鲤的养殖实践和物种保护提供了重要的参考依据。
池塘内循环水“跑道”养殖与池塘传统养殖翘嘴鲌肌肉营养成分和挥发性风味物质的比较
蔡丽, 魏泽宏, 唐涛, 刘少军, 麦康森
 doi: 10.11964/jfc.20210412770
[摘要](104) [HTML 全文](59) [PDF 4804KB](7)
摘要:
为探究池塘内循环水“跑道”养殖与池塘传统养殖鱼类在肌肉营养品质与挥发性风味化合物方面的差异,以翘嘴鲌为研究对象,通过氨基酸自动分析仪、高效液相色谱法以及气相色谱-离子迁移谱(GC-IMS)联用技术对两种养殖方式下的翘嘴鲌肌肉进行了氨基酸、脂肪酸和挥发性风味物质的鉴定与分析,并建立了两种不同养殖模式下翘嘴鲌肌肉挥发性风味物质的指纹图谱。结果显示,两种养殖方式下的翘嘴鲌肌肉蛋白脂肪无显著性差异,“跑道”养殖组翘嘴鲌显著提高了肌肉中必需氨基酸[(8.54 ± 0.01) g/100 g]和总氨基酸含量[(17.36 ± 0.00) g/100 g]。在两种翘嘴鲌肌肉中共鉴定到23种挥发性风味化合物,相较于池塘传统养殖组,“跑道”养殖组提高了翘嘴鲌肌肉中2-庚酮、正己醇和1-辛烯-3-醇的含量,降低了乙醇、2-丁酮、3-羟基-2-丁酮、丁醛、3-甲基-丁醛、2-甲基-丁醛、正戊醛、正庚醛、苯甲醛、正辛醛和壬醛的含量。“跑道”养殖组翘嘴鲌相较于池塘传统养殖组,降低了部分能产生不愉悦气味的化合物的含量,具有改善肌肉挥发性气味的潜能。研究表明,“跑道”养殖翘嘴鲌在不改变肌肉成分的基础上,改善了翘嘴鲌肌肉氨基酸和风味物质的组成。以上结果为池塘内循环水“跑道”养殖模式养殖下的翘嘴鲌肉质评价提供了理论依据。
大菱鲆对饲料精氨酸的需求量及饲料精氨酸水平对大菱鲆生长和代谢的影响
付丰顺, 刘成栋, 王旋, 周慧慧, 麦康森, 何艮
 doi: 10.11964/jfc.20210312693
[摘要](184) [HTML 全文](75) [PDF 2582KB](9)
摘要:
为研究大菱鲆最适饲料精氨酸需求量及饲料精氨酸水平对大菱鲆生长和代谢的影响,选取初始体质量为(43.07±0.10) g的大菱鲆为对象,使用酪蛋白和明胶作为蛋白质来源,鱼油和大豆卵磷脂作为脂质来源,配制5组等氮等脂(51%粗蛋白和12.5%粗脂肪)的精制饲料,通过添加晶体氨基酸混合物,使得饲料中精氨酸含量分别为干物质的1.92%、2.65%、3.40%、4.17%和4.88% (对应饲料号为1、2、3、4、5),以喂食1.92%精氨酸水平饲料的处理组作为对照组,每个处理3个重复,每个重复12尾鱼,养殖周期为10周。结果显示,与对照组相比,3.40%~4.88%饲料精氨酸水平(占饲料蛋白质6.66%~9.52%)显著改善了大菱鲆的生长性能和饲料利用率。基于特定生长率(SGR)的折线回归分析,大菱鲆的最适饲料精氨酸需求量为饲料干物质的3.17%,饲料蛋白质的6.21%。适宜的饲料精氨酸水平显著提高了鱼体蛋白含量和血浆总蛋白水平,同时显著降低了血浆葡萄糖水平。此外,适宜的饲料精氨酸水平显著提高了肝脏脂肪酸合成、脂肪酸β-氧化、糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化相关基因的表达,而显著降低了肝脏氨基酸降解相关基因的表达。研究表明,3.40%~4.88%饲料精氨酸水平(占饲料蛋白质6.66%~9.52%)可以调节大菱鲆的营养代谢,并促进大菱鲆的生长。
在体条件下miR-305-5p对日本沼虾MnCHT3A的靶向调控作用
岳凯迪, 陈柯, 杜鹃, 吕艳杰, 杨洪, 宁黔冀
 doi: 10.11964/jfc.20200912427
[摘要](14) [HTML 全文](9) [PDF 2539KB](0)
摘要:
为了探索miRNA对日本沼虾几丁质酶3A(Macrobrachium nipponense chitinase 3A, MnCHT3A)基因的调控作用,本实验采用生物信息学方法预测并筛选与MnCHT3A靶向结合的miRNA——miR-305-5p;利用qRT-PCR、生物化学以及组织学方法,研究了在体(in vivo)条件下,miR-305-5p对靶基因的调控作用。结果显示,一个蜕皮周期中miR-305-5p与MnCHT3A的表达量呈负相关,前者C期最高A期最低;而MnCHT3A的表达趋势则相反。注射miR-305-5p mimics和miR-305-5p inhibitor后,与对照组相比,MnCHT3A转录水平分别降低60%和升高166%;MnCHT酶活性分别降低39.53%和升高133%。组织学观察发现,C期的头胸甲表皮为3层结构,由外向内依次为上表皮、外表皮和内表皮(苏木精—伊红染色,H.E染色);几丁质荧光染色结果显示,几丁质分布在内、外表皮;扫描电镜结果清晰显示了内、外表皮的板层结构。与对照组相比,miR-305-5p mimics组内表皮的板层厚度增加,呈蓝色荧光的几丁质条带有增厚趋势;而miR-305-5p inhibitor组表皮结构紊乱,几丁质荧光分布不均一且部分区域明显减弱。研究表明,miR-305-5p的靶基因是MnCHT3A,在体条件下,miR-305-5p能够靶向抑制MnCHT3A的转录。
金属蛋白酶组织抑制剂在皱纹盘鲍抗弧菌免疫中的作用
张明辉, 章骞, 林锦锦, 张凌晶, 刘光明, 陈玉磊, 曹敏杰
 doi: 10.11964/jfc.20201012430
[摘要](62) [HTML 全文](40) [PDF 1728KB](7)
摘要:
由弧菌感染引起的疾病是影响鲍存活率的主要因素,实验以皱纹盘鲍为研究对象,探讨金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of Metalloproteinase, TIMP)在皱纹盘鲍抗弧菌免疫中的功能及其与基质金属蛋白酶1 (matrix metalloproteinase 1, MMP-1)相互作用关系。实验通过PCR技术克隆得到了TIMP cDNA序列,全长为2291 bp。利用NetNGlyc 1.0 Server和NetOGlyc 4.0 Server对TIMP的氨基酸序列进行分析,结果显示,TIMP有3个潜在的N-糖基化位点,分别位于第47、77、152位的Asn,以及一个潜在的O-糖基化位点,即位于第108位的Thr。多序列比对结果显示,皱纹盘鲍TIMP氨基酸序列与杂色鲍、太平洋牡蛎、泥蚶中TIMP的序列相似性分别为76.0%、18.9%和19.3%。利用荧光定量PCR技术分析了副溶血弧菌感染过程中皱纹盘鲍不同组织中TIMP的表达情况,发现在弧菌感染早期,TIMP在血淋巴细胞和鳃组织中的表达量均显著上调。利用RNA干扰技术分别敲低皱纹盘鲍TIMPMMP-1的表达水平,研究TIMPMMP-1在皱纹盘鲍抗弧菌免疫中的相互作用关系。结果显示,鲍鱼体内MMP-1表达沉默后,TIMP表达显著上调;而TIMP表达受到抑制时,MMP-1表达量显著下降,说明TIMP表达受MMP-1负调控,而MMP-1表达受TIMP正调控。本研究将有助于揭示TIMP及其与MMP-1相互作用在皱纹盘鲍先天免疫反应中的功能,也可为鲍鱼养殖的病菌防治策略提供新的思路。
水环境细菌病原数据库的构建及应用
董鹏生, 郭海朋, 王艳婷, 程皇位, 王凯, 洪慢, 侯丹迪, 吴宇华, 张德民
 doi: 10.11964/jfc.20210612935
[摘要](123) [HTML 全文](53) [PDF 3189KB](6)
摘要:
水环境病原菌对人类和水生动物的健康以及水产品生物安全带来了重大威胁,是公共卫生、水产养殖、食品安全等行业的重点监测对象。然而水环境病原菌数据库建设相对滞后,相关数据库分散在临床医学和水产动物病害等领域,且缺乏信息交流与融合,完整性仅限于各自独立的学科,不能满足区域尺度或生态学视角下,大规模水源性病原鉴定及生物安全评价等高通量监测的需求。因此,本研究通过整理人类介水传染病、水生动物、哺乳动物、植物和跨宿主疾病等7大类细菌病原信息,构建多线程可调度通讯模型和全局序列匹配算法,开发了水环境细菌病原数据库 (DPiWE,dayuz.com)。DPiWE收集了14门、27纲、54目、116科、221属、1 097种的9 070株细菌病原分类、16S rRNA基因、宿主 (195种) 和感染类型 (21种) 信息。并在Web端实现信息检索、序列比对和注释结果可视化等功能。案例分析显示,DPiWE构建的系统发育网络,清晰地将养殖环境菌株DS10−D19划分为鳆发光杆菌;用DPiWE对海水混养系统细菌高通量测序结果进行注释,揭示3种养殖动物病原分布具有明显差异,患病组水体有传播人体和鱼类共患病病原的风险。DPiWE及配套分析流程可为水环境生物安全高通量评价、渔业生态健康维护和水产动物病害个性化防治提供新的思路和数据基础。
三亚鹿回头礁区造礁石珊瑚的摄食特征
甘健锋, 俞晓磊, 罗勇, 黄林韬, 刘骋跃, 江雷, 黄晖
 doi: 10.11964/jfc.20200912399
[摘要](76) [HTML 全文](37) [PDF 2367KB](3)
摘要:
能量与营养物质的正常获取是维系造礁石珊瑚生命活动的基础,这主要与其两种营养方式—光合自养和异养营养有关。当前,国内外学者对造礁石珊瑚的研究以光合自养为主,而对其异养营养的认识则相对不足。基于此,本研究以鹿回头礁区(海南三亚)的3种代表性造礁石珊瑚—丛生盔形珊瑚、鹿角杯形珊瑚和美丽鹿角珊瑚为对象,通过投喂丰年虫无节幼体、水族用桡足类、酵母浸出粉溶液及水族珊瑚粮这4种食物,探讨了3种造礁石珊瑚的食性、摄食方式。结果显示,丛生盔形珊瑚对上述4种食物均表现出明显的摄食行为;相反,美丽鹿角珊瑚对4种食物均不表现摄食行为;鹿角杯形珊瑚只摄食尺寸较小的丰年虫无节幼体和水族珊瑚粮,并首次发现其在摄食丰年虫无节幼体时水螅体间相互协作以及通过释放肠系膜摄食水族珊瑚粮的现象。进一步研究丛生盔形珊瑚对丰年虫无节幼体的摄食速率和消化情况,发现其摄食速率与丰年虫无节幼体密度符合米氏方程,且其消化周期约为3 h。研究结果有助于更加深入地认识造礁石珊瑚摄食取向及其摄食过程,可为造礁石珊瑚人工养殖过程中的饵料选择提供借鉴。
文蛤SRBI基因变异与红壳色性状的关联性
施鹤鸣, 董迎辉, 姚韩韩, 包永波, 林志华
 doi: 10.11964/jfc.20201012432
[摘要](96) [HTML 全文](51) [PDF 5222KB](10)
摘要:
为了解文蛤类胡萝卜素代谢相关基因清道夫受体B类I(Mm-SRBI)与红壳色形成的关联性,采用直接测序法对基因编码区进行SNP筛查和关联分析,并用免疫荧光、蛋白免疫印迹分析了Mm-SRBI蛋白在红、白壳色文蛤外套膜中的表达差异。结果显示,在Mm-SRBI基因的编码区筛选到15个SNP位点,位于保守序列上的4个突变位点c.647C/T、c.723A/G、c.818C/T、c.1037A/G与红、白壳色存在显著关联,其中c.723A/G位点为非同义突变(异亮氨酸突变为缬氨酸),且4个位点在遗传上存在强连锁性;蛋白免疫印迹与免疫荧光结果表明,Mm-SRBI在红壳中的蛋白表达量显著高于白壳文蛤,主要表达部位为外套膜边缘膜的纤毛处。研究表明,Mm-SRBI基因的高表达与变异可能导致文蛤对类胡萝卜素的代谢产生差异,从而在生长发育过程中导致红壳色的形成。
水产品副产物蛋白回收和高值化利用研究进展
赵勇, 武艺, 李玉锋, 刘海泉, 王敬敬
 doi: 10.11964/jfc.20200912391
[摘要](96) [HTML 全文](38) [PDF 2350KB](2)
摘要:
水产品由于其丰富的营养价值,在世界范围内的需求量持续增加。然而,水产品消费与加工过程中产生的大量副产物,带来了严重的资源浪费和环境污染等问题。鉴于此,水产品加工副产物依据其不同特性已经被开发应用到诸多领域。其中,水产品副产物蛋白因其独特的功能特性与较高的经济附加值,在实际生产中得到了广泛的回收和利用。因此,本文综述了现阶段广泛用于回收水产品副产物蛋白的物理学、化学和生物学方法,同时,介绍了鱼类、甲壳类和贝类副产物蛋白高值化利用的研究进展,并对水产品副产物蛋白未来的发展趋势进行展望,旨在进一步提升水产品副产物资源的综合利用潜力,促进我国水产品产业高质量发展。
军曹鱼的胚胎发育及仔稚鱼形态观察
邝杰华, 陈刚, 马骞, 黄建盛, 张健东, 施钢, 王忠良, 汤保贵
 doi: 10.11964/jfc.20200812389
[摘要](709) [HTML 全文](288) [PDF 2800KB](30)
摘要:
为了探明军曹鱼早期发育阶段的特征和规律,本实验通过连续显微观察,记录分析其胚胎及仔稚鱼发育各时期的形态特征和发育特点。结果显示,军曹鱼受精卵呈圆球形,为浮性卵,卵径(1.245±0.065) mm,油球1个,油球直径(0.325±0.027) mm。在水温(27.0±0.5)℃、盐度29、pH值8.3的条件下,军曹鱼卵从受精至孵化出膜约需26 h 30 min,经历合子、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官形成和孵化出膜7个阶段,共24个时期。初孵仔鱼平均全长(3.254±0.096) mm,仔鱼在孵化后第3天开口摄食,眼囊变黑,卵黄囊被消耗约80%,第5天卵黄囊消失,第7天油球耗尽,转化为外源性营养。孵化后第14天全长(19.933±1.118) mm,各鳍鳍条形成,进入稚鱼期;22日龄稚鱼全长(41.140±3.779) mm,尾柄部开始出现鳞片,46日龄的后期稚鱼全长达(116.667±5.916) mm,体表完全覆盖鳞片,除尾鳍形状外,体形与成鱼相似。
以优化的BP神经网络模型为基础研究山东近海口虾蛄空间分布与环境因子的关系
李鹏程, 张崇良, 任一平, 徐宾铎, 薛莹
 doi: 10.11964/jfc.20200712336
[摘要](537) [HTML 全文](336) [PDF 6103KB](24)
摘要:
BP神经网络模型作为一种常用的机器学习方法,被广泛应用于物种分布模型,来解析生物分布与环境因子的关系。与传统回归模型相比,该模型可以灵活处理变量间的非线性关系,但其结构复杂,在参数设置方面存在不确定性,从而影响模型的预测与应用。根据2016—2017年山东近海口虾蛄渔业资源调查与环境数据,利用BP神经网络模型构建口虾蛄资源分布模型,同时利用数据分组处理算法(group method of data handling, GMDH)、遗传算法(genetic algorithm, GA)和自适应算法(adaptive algorithm)分别对模型输入变量、初始权值和隐节点数目3方面进行优化,构建7种不同组合优化模型。结果显示,7种模型的优化效果存在明显差异,单方面和两方面组合优化模型预测性能基本保持一致;而3方面共同优化其均方根误差和残差平方和分别为0.35和1.94,较初始模型的0.52和2.40更小,且相关系数最大为0.45,表明模型优化效果最好。对比优化前后发现,口虾蛄资源密度随纬度和底层盐度变化趋势基本保持一致,而随底层温度的升高,口虾蛄资源密度存在较大差异。此外,最优模型较初始模型增加水深为关键环境因子,对口虾蛄的资源密度具有重要影响。本研究进一步开发了BP神经网络模型参数优化的方法,证明了参数优化对BP模型的预测性能具有重要影响,模型优化对于分析口虾蛄资源密度与环境因子的关系具有重要意义。
酵母水解物对低盐胁迫凡纳滨对虾非特异性免疫及抗氧化能力的影响
陈永康, 陈泽恩, 梁武辉, 黎国勇, 胡骏鹏, 杨志龙, 聂琴, 迟淑艳
 doi: 10.11964/jfc.20200912418
[摘要](125) [HTML 全文](46) [PDF 1376KB](1)
摘要:
为研究饲料中添加酵母水解物对凡纳滨对虾在低盐胁迫条件下非特异性免疫和抗氧化能力的影响,选取凡纳滨对虾[初始体质量(15.82±0.08) g]进行实验。实验用对虾平均分为2组,对照组投喂基础饲料(Y0),实验组投喂添加了3%酵母水解物的实验饲料(Y3),在室内养殖 (盐度为28) 15 d后分别放入盐度为4(S4)和28(S28)的水体中进行低盐胁迫实验,每个处理组3个重复,每个重复30尾虾(根据饲料和盐度不同组合,分组命名为Y0S4、Y0S28、Y3S4、Y3S28)。结果显示,饲料中添加3%酵母水解物对凡纳滨对虾血清酚氧化酶(PO)、总一氧化氮合成酶(TNOS)活性没有显著影响,但低盐胁迫1.0 h时,Y3S4组PO、TNOS活性显著高于Y0S4组;盐度因素对PO、TNOS活性产生显著影响,低盐胁迫1.0 h时,S28组PO、TNOS活性显著高于S4;饲料中添加3%酵母水解物显著提高了凡纳滨对虾肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)活性;盐度对酸性磷酸酶(ACP)活性产生了显著影响,S28组ACP活性显著高于S4。研究表明,在饲料中添加酵母水解物能够提高凡纳滨对虾肝胰腺SOD活性,提高对虾的抗氧化能力;凡纳滨对虾在低盐胁迫时,能迅速恢复PO、TNOS活性至正常水平,从而提高对虾抵抗不良环境的能力。
仿刺参幼参对亮氨酸最适需求量的研究
刘财礼, 王际英, 李宝山, 沈钰博, 孙永智, 黄炳山, 王世信
 doi: 10.11964/jfc.20210112572
[摘要](145) [HTML 全文](46) [PDF 7740KB](2)
摘要:
为探究仿刺参幼参对亮氨酸的最适需求量,在基础饲料中分别添加0.00%、0.80%、1.60%、2.40%、3.20%和4.00%的包膜亮氨酸,配成亮氨酸含量分别为1.29%(D1,对照组)、1.63%(D2)、1.98%(D3)、2.22%(D4)、2.58%(D5)和2.97%(D6)的6组实验饲料,饲喂初始体质量为(16.40 ± 0.14) g的仿刺参幼参60 d。结果显示:①随饲料亮氨酸含量从1.29%提高到1.98%,仿刺参幼参的增重率和特定生长率显著升高,在D3组增重率达到最大值100.84%, 随亮氨酸含量进一步提高,增重率和特定生长率显著降低,但D3、D4和D5组增重率和特定生长率还是显著高于对照组;②随饲料亮氨酸含量从1.29%提高到1.98%,仿刺参体壁的粗脂肪含量显著升高,在D3组达到最大值5.50%,且显著高于其他组,随亮氨酸含量进一步提高,仿刺参体壁粗脂肪含量显著降低,各组间水分、粗蛋白和粗灰分含量均无显著性差异;随饲料亮氨酸含量的升高,仿刺参体壁亮氨酸和蛋氨酸含量显著提高;③随饲料亮氨酸含量从1.29%提高到1.98%,仿刺参肠道脂肪酶和蛋白酶活性显著提高,饲料亮氨酸含量进一步提高时,脂肪酶和蛋白酶活性均显著降低,D3组脂肪酶活性显著高于其他组,D2、D3和D4组蛋白酶活性显著高于其他组;④随饲料亮氨酸含量从1.29%提高到1.98%,仿刺参肠道谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性和总抗氧化能力显著升高,超过1.98%后,谷草转氨酶活性趋于平稳,而谷丙转氨酶活性和总抗氧化能力显著降低,D3组谷丙转氨酶活性显著高于其他组,D3组总抗氧化能力显著高于D1、D2、D5和D6组,随饲料亮氨酸含量从1.29%提高到1.98%,仿刺参肠道丙二醛含量显著降低,当饲料亮氨酸含量超过2.22%后,丙二醛含量显著升高,D3和D4组丙二醛含量显著低于其他组。研究表明,以增重率为评价指标,经一元二次回归分析得出,体质量为16.40 g的仿刺参幼参对饲料中亮氨酸的最适需求量为2.11%(10.37%饲料粗蛋白)。
以双拖渔船为例分析浙江省海洋捕捞渔船捕捞区域差异
刘勇, 程家骅, 陈挺
 doi: 10.11964/jfc.20200412247
[摘要](591) [HTML 全文](251) [PDF 6051KB](15)
摘要:
海洋捕捞渔船现为属地化管理,但其海上生产具有跨地区管辖水域作业特点。传统上,各地渔船因在近岸水域沿袭地方捕捞经验与传统捕捞习惯,均具显著的地方特性。但随着捕捞渔船的钢质化、大型化,海洋捕捞的作业空间不断扩展,了解与掌握当前海洋捕捞是否具有区域特征差异,对于渔业抽样统计调查研究和精准渔业管理有着重要的科学理论指导意义。本研究选择海洋渔业大省浙江的双拖作业渔船为研究对象,通过大样本随机抽样调查,主要获取浙江省3个地区(宁波、舟山和台州)双拖作业渔船的整年生产数据,研究了其各月渔船捕捞能力[单位捕捞努力量渔获量(CPUE)]及其渔获结构的区域差别。结果显示,除9月外,三地渔船捕捞能力存在显著区域差异,宁波与台州相对更为接近。全年捕捞渔获结构,三地具有较为明显的差异。分月捕捞渔获结构,台州地区相对独立并自成一类,而宁波与舟山地区相似度相对较高。综合考虑渔船捕捞能力和渔获结构交互效应,三地间的差别更为显著。尽管我国海洋捕捞渔船的生产活动较40年前范围更广、灵活性更高,但捕捞作业的区域特征差异依旧明显,表明我国海洋渔业管理工作更应精准化,以不断提升我国海洋渔业的空间科学管理水平。
黄鳍棘鲷标志放流群体的规格适宜性评价
吕少梁, 林坤, 曾嘉维, 张申增, 陈志劼, 王学锋
 doi: 10.11964/jfc.20200412224
[摘要](642) [HTML 全文](307) [PDF 5862KB](22)
摘要:
合理选取标志放流鱼的规格是成功监测放流鱼类动态及评估增殖效果的关键步骤。本研究以黄鳍棘鲷为对象,通过2个实验评价标志鱼的适宜规格。实验1对比了4种体长的黄鳍棘鲷(平均体长5、7、11和14 cm)作T型标志后其生长、存活和标志保留情况,并利用逻辑斯蒂回归模型分别分析标志鱼存活率和标志保留率的规格特异性;实验2模拟了不同混合比例下2种体长黄鳍棘鲷标志鱼与不标志鱼的捕捞情况,并利用重抽样方法对捕捞结果作计算机重抽样,分析2种鱼能否充分混合以及标志鱼的规格、比例对捕捞结果的影响。结果显示:①7、11和14 cm标志组的特定生长率与对照组无显著差异;②标志鱼的存活率随体长的增加而增加(5 cm标志组的鱼在标志后7 d内全部死亡,7、11和14 cm标志组的存活率分别为77.5%、92.5%和100%)。标志鱼的存活率与初始体长的逻辑斯蒂回归关系式为P=exp(0.099X−6.900)/[1+exp(0.099X−6.900)];③各组的标志保留率较高(7、11和14 cm标志组的标志保留率分别为97.5%、100%和100%),但与体长无明显关系;④模拟捕捞结果与计算机重抽样结果无显著差异,二者均不受鱼体规格的影响,但受标志鱼比例的影响极显著,标志鱼比例越高,其捕获率也越高。综上,建议今后采用T型标志方法开展增殖放流品种(如黄鳍棘鲷)的相关研究时,应综合考虑成本和可接受的误差范围以选择符合研究目的的标志鱼规格,若需标志鱼的存活率高于50%,则体长至少为7 cm,高于75%则体长至少为8 cm,高于95%则体长至少为10 cm。此外,在成本允许的条件下,建议尽可能增加放流鱼类中标志鱼的比例以提高增殖效果评估的代表性,而具体适宜的比例值得深入研究。
牟氏角毛藻和海洋红酵母对玉足海参浮游幼体发育、生长及成活率的影响
于宗赫, 黄文, 马文刚, 霍达, 刘文广, 许强
 doi: 10.11964/jfc.20200512277
[摘要](550) [HTML 全文](239) [PDF 5967KB](18)
摘要:
为了考察海洋红酵母是否适合作为替代饵料用于玉足海参浮游幼体培育,本研究利用牟氏角毛藻和海洋红酵母单独投喂和按照一定比例混合投喂对玉足海参浮游幼体生长、发育以及成活率的影响。将牟氏角毛藻液与海洋红酵母稀释液按照4∶0、3∶1、2∶2、1∶3和0∶4的体积比混合后投喂玉足海参浮游幼体,依次标记为A、B、C、D和E组。结果显示,仅投喂角毛藻的A组幼体的生长和发育速率最快,实验开始后该组幼体可以在第10天进入大耳幼体阶段,第18天进入樽形幼体阶段;同时,A组幼体的成活率最高,至实验结束时其平均成活率为58.73%±2.75%。相比之下,整个实验过程中D和E组幼体一直停滞在小耳幼体阶段,且无法形成球状体;其中E组幼体的体长一直呈负增长状态,至实验结束时其平均成活率仅为22.22%±5.50%。研究表明,随着饵料中海洋红酵母比例的增加,玉足海参浮游幼体的生长、发育及成活率均受到不利影响。因此,海洋红酵母并不适合作为替代饵料用于玉足海参浮游幼体培育。
不同电学参数和流速下的拦鱼电栅对草鱼幼鱼的拦导效率
石迅雷, 胡成, 达瓦, 尼玛, 王庆富, 石小涛, 刘国勇
 doi: 10.11964/jfc.20200712354
[摘要](607) [HTML 全文](253) [PDF 6270KB](11)
摘要:
为了探究不同电学参数的拦鱼电栅在静水条件下对草鱼幼鱼[体长(10.22 ± 2.01) cm、体质量(34.25 ± 3.62)g]趋避行为的影响,本研究构建了一种双排式的拦鱼电栅,在静水条件下采用3因素4水平正交实验设计,测试了脉冲电压、脉冲频率、脉冲宽度等脉冲直流电参数对拦鱼效果的影响;为了探究静水下拦鱼效果最佳的拦鱼电栅电学参数在不同流速下的适应性,在鱼道模型中设置了3种流速条件(0.15、0.25和0.35 m/s)分别进行放鱼实验,测试了不同流速下拦鱼电栅对鱼道进口诱鱼效率的影响。结果显示,(1)在静水条件下,工况7阻拦率最高(88.67 ± 1.10)%、平均昏迷率较低,对拦鱼效果的影响由大到小的因素分别为脉冲电压、脉冲频率、脉冲宽度;(2) 通过方差分析和单因素多重比较,得到了在静水条件下对草鱼幼鱼的拦鱼效果最佳的拦鱼电栅电学参数:脉冲电压设置为160 V/m、脉冲频率为6 Hz、脉冲宽度为16 ms;(3) 采用静水条件下的最佳电学参数设置(脉冲电压为160 V/m、脉冲频率为6 Hz、脉冲宽度为16 ms),当河道流速为0.15 m/s时,拦鱼电栅的开启能够显著提高草鱼幼鱼的鱼道进口诱集率和鱼道进口停留时间比率;而当河道流速为0.25和0.35 m/s时,开启拦鱼电栅不能显著提高草鱼幼鱼在鱼道进口诱集率和鱼道进口停留时间比率。研究表明,静水条件下拦鱼效果最佳的脉冲直流电参数为脉冲电压160 V/m、脉冲频率6 Hz、脉冲宽度16 ms;在实验的3种河道流速下采用静水条件下拦鱼效果最佳的脉冲直流电参数时,鱼道进口效率最佳的河道流速为0.15 m/s。实验结果可为实际工程中拦鱼电栅的布置提供参考。
饲料中胆碱对大口黑鲈幼鱼生长性能、体成分和血清抗氧化机能的影响
周越, 王伟隆, 李松林, 吕红雨, 陈乃松, 张松, 黄旭雄
 doi: 10.11964/jfc.20200812380
[摘要](788) [HTML 全文](366) [PDF 6523KB](58)
摘要:
为研究饲料中胆碱对大口黑鲈幼鱼生长性能、体成分以及血清抗氧化机能的影响,在基础饲料中分别添加0 (对照组)、700、1 400、2 100和2 800 mg/kg的氯化胆碱,配制成5组等氮等能的实验饲料 (胆碱实测含量分别为2 369.57、2 716.90、2 993.49、3 443.60和3 799.05 mg/kg饲料),分别投喂初始体质量为 (20.00±0.10) g的大口黑鲈幼鱼56 d。结果显示,实验鱼的增重率 (WGR) 和特定生长率 (SGR) 随着饲料中氯化胆碱添加量的提高呈先升后降,在添加量为2 100 mg/kg饲料组均达到最大值,显著高于对照组;饲料中添加氯化胆碱对实验鱼的存活率 (SR)、肝体比 (HSI)、脏体比 (VSI) 和肥满度 (CF) 无显著影响。当氯化胆碱添加量达到2 100 mg/kg饲料及以上时,鱼体肌肉和肝脏的粗脂肪含量均显著低于对照组。相比于对照组,添加1 400~2 800 mg/kg饲料的氯化胆碱组鱼体血清中总抗氧化能力 (T-AOC)、超氧化物歧化酶 (SOD) 活性和过氧化氢酶 (CAT) 活性显著提高,血清中丙二醛 (MDA) 的含量显著降低;氯化胆碱添加量为2 100 mg/kg饲料组鱼体血清溶菌酶 (LZM) 和谷草转氨酶 (AST) 的活性分别达到最大值和最小值,且与对照组差异显著。研究表明,饲料中适量添加氯化胆碱可显著提高大口黑鲈幼鱼的生长性能、降低肝脏脂肪含量及增强血清抗氧化能力。回归分析显示大口黑鲈幼鱼饲料中氯化胆碱建议添加量为2 008.50 ~2 398.16 mg/kg (饲料胆碱含量为3 432.09 mg/kg~3 530.23 mg/kg)。
条斑紫菜单孢子形成相关基因(PyMFG)的特性及其表达差异
宋珊珊, 丁洪昌, 严兴洪
 doi: 10.11964/jfc.20190311710
[摘要](1115) [HTML 全文](384) [PDF 2804KB](30)
摘要:
以条斑紫菜转录组测序筛选得到的差异性表达基因(Contig-21827)序列为基础,采用RT-PCR技术克隆得到了条斑紫菜单孢子形成相关基因PyMFG的完整开放阅读框。对其进行序列分析发现,PyMFG基因的ORF全长为1 224 bp,编码一个包含407个氨基酸的多肽片段,其分子量为46.24 ku,等电点为9.08。结构域分析结果显示,该蛋白含有保守的TEA结构域和YAP结构域,属于TEA-ATTS超家族结构域。通过多序列比对和系统进化分析发现,该蛋白与真菌分生孢子形成蛋白聚为一个大的分支,亲缘关系较近。此外,不同品系间的单孢子放散能力和qRT-PCR分析结果显示,PyMFG基因在PY26WPY26W'品系中的表达趋势与宏观统计结果高度一致,在PY26RPY26R'品系中的表达则与统计结果存在差异。由此推断,父本(PY26W)/偏父本品系(PY26W')中调控单孢子形成、放散的相关基因种类和具体分子机制与母本(PY26R)/偏母本品系(PY26R')存在差异,因而导致单孢子的宏观统计结果与荧光定量结果存在差异。
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2021-09期封面
2021, 45(9): 0-0.  
[摘要](30) [HTML 全文](24) [PDF 42651KB](5)
摘要:
2021-09期目录
2021, (9): 1-2.  
[摘要](25) [HTML 全文](24) [PDF 218KB](2)
摘要:
草鱼mst2在免疫应答中的作用机制
李亚男, 唐美珍, 卢志杰, 林蠡, 秦真东
2021, 45(9): 1453-1464.   doi: 10.11964/jfc.20210312685
[摘要](90) [HTML 全文](43) [PDF 1726KB](7)
摘要:
为了初步阐明草鱼哺乳动物STE20样蛋白激酶2基因(mammalian sterile 20-like kinase 2, mst2)在机体免疫中的作用机制,实验采用RNA-Seq技术对干扰mst2后经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)应激的草鱼肾细胞系(Ctenopharyngodon idella kidney cell lines, CIK)进行了转录组测序与验证分析。测序原始数据经De novo 拼接与组装后共获得22 374 个独立功能基因(unigenes),其中已知功能基因为21 199 个,预测的新基因为1 175 个。干扰mst2后经LPS应激的unigenes 表达差异分析表明,对照组与实验组之间共存在38个差异基因(differentially expressed genes,DEGs),其中上调基因16个,下调基因22个。利用实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)对38个DEGs的RNA-Seq结果进行验证,结果显示,qRT-PCR和RNA-Seq分析一致,说明RNA-Seq分析结果可靠。采用RNA干扰技术干扰mst2后经LPS处理,CIK细胞转录组中DEGs参与免疫代谢的途径主要有MAPK信号通路、内吞作用途径、自噬途径和细胞因子受体相互作用途径。凋亡相关基因检测结果显示,干扰mst2并经LPS处理后,促凋亡基因(fasbad1、bad2、caspase-3、caspase-8和caspase-9)转录水平上调,抗凋亡基因(bcl2)转录水平下调,证明干扰mst2后经LPS处理会诱发细胞发生凋亡。综上所述,mst2可通过调控凋亡相关过程参与机体免疫反应。本研究结果初步阐明了草鱼mst2参与机体免疫应答的分子机理,可为草鱼细菌性疾病防控提供一定的基础理论参考。
病毒感染过程中青鳉irf2基因过表达的双面性
姜正正, 罗君志, 申萍, 王志, 庞连慧, 潘启华, 刘红, 陈天圣
2021, 45(9): 1465-1477.   doi: 10.11964/jfc.20210412797
[摘要](84) [HTML 全文](40) [PDF 3304KB](6)
摘要:
为了探究干扰素调节因子2 (interferon regulatory factor,IRF2)如何通过调控干扰素(IFN)表达影响鱼类的免疫,实验从青鳉中克隆了irf2 (Olirf2),发现该基因在青鳉各个组织中均有表达;将构建的真核表达载体pTol2/CMV-IRF2/IE1-pr转染到胖头鱥肌肉细胞系(FHM)后,发现瞬时过表达Olirf2能够显著促进鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)的复制,并抑制抗病毒相关基因mx1、ifnirf3的表达。进一步通过双荧光素报告系统发现,Olirf2能够显著抑制NF-κB和ISRE的活性,说明Olirf2可能通过抑制细胞的天然免疫应答进而促进病毒的增殖。然而持续过表达Olirf2则增强了细胞的抗病毒能力,同时促进干扰素相关基因mx1、ifnirf3的表达。因此,Olirf2基于表达的持续时间不同而具有抗病毒或者促病毒的双面效果。实验通过研究Olirf2在抗病毒信号通路中发挥的作用,为通过基因编辑或者转基因手段来构建抗病毒的鱼类提供了理论基础。
三倍体湘云鲫2号IFNa3基因的克隆及功能初探
吴慧, 侯利芬, 黄嘉仪, 冯浩
2021, 45(9): 1478-1490.   doi: 10.11964/jfc.20210512839
[摘要](120) [HTML 全文](62) [PDF 2957KB](5)
摘要:
三倍体湘云鲫2号具有不育、生长快、抗病抗逆性强等优良特性。为探究其抗病优势分子机制,实验克隆及鉴定了三倍体湘云鲫2号干扰素a3(3nIFNa3)。3nIFNa3的CDS由552个核苷酸组成,编码184个氨基酸。经预测,3nIFNa3 N端23位氨基酸为信号肽;3nIFNa3成熟肽中存在2个半胱氨酸残基并参与形成二硫键,表明其隶属于Ⅰ型一组干扰素。实时荧光定量PCR (qPCR) 结果显示,宿主细胞经poly I∶C刺激后8 h、草鱼呼肠孤病毒 (GCRV) 或鲤春病毒血症病毒 (SVCV) 感染后48 h,3nIFNa3的转录水平达到最高。免疫印迹和免疫荧光结果显示,3nIFNa3为分泌型蛋白,分子量约为21.8 ku,其在出胞前主要分布于细胞质中。进一步研究发现,在宿主细胞中过表达3nIFNa3或含3nIFNa3的上清培养基孵育宿主细胞均能诱导内源ISG基因转录水平的显著提高。其中,3nSTAT1及3nVIPERIN在含3nIFNa3的上清培养基孵育后2 h转录水平达到最高,3nPKR则在4 h表达水平最高。此外,病毒滴度测定及结晶紫染色实验表明,EPC细胞经3nIFNa3孵育或过表达3nIFNa3后,其抗GCRV和SVCV的能力均显著增强。研究表明,3nIFNa3为可分泌的细胞因子,在宿主抗病毒天然免疫反应中发挥作用。
克氏原螯虾白斑病毒株(WSSV-Cc)基因组的一个印迹
柯飞, 桂朗, 李涛, 张奇亚
2021, 45(9): 1491-1499.   doi: 10.11964/jfc.20210512878
[摘要](81) [HTML 全文](45) [PDF 3288KB](2)
摘要:
从自然感染、濒死的克氏原螯虾中分离出的白斑病毒株(Cambarus clarkii whispovirus, WSSV-Cc或Cc株)是一株基因组较小的新毒株。为寻找白斑病毒进化过程在基因组中留下的印迹,进行了显微和超微观察、基因组架构与系统发育分析及相关基因扩增等研究。选择Cc株74L、86L、87R、88R、92R 和 95R的6个基因,与8个白斑病毒株的同源基因所编码蛋白序列构建进化树,结果可分为克氏原螯虾病毒 (Cc株、CN02株、Pc株)和海水对虾病毒 (CN株、CN01株、CN03株、CN04株、TW株和KR株) 2支。再对不同毒株的同源蛋白进行多重序列比对,显示Cc-87R是与海水对虾病毒株同源蛋白差异显著、缺失跨膜区(TMD)及其相邻287 aa序列、但仍有完整PI3K_rbd结构域的病毒膜蛋白。进一步设计和使用87R-F/87R-R和238-F/87R-R两对引物,分别以淡水小龙虾病毒Cc株和海水对虾病毒CN株的基因组为模板进行核酸扩增,结果从Cc株模板中扩增到大小为709 bp,含Cc-87R全部序列的核酸片段;而从CN株的模板中却扩增到大小分别为1 600和4 810 bp,仅含Cc-87R部分序列的核酸片段,为Cc-87R是Cc株基因组中一个序列结构独特的印迹提供了实验证据。这一发现将有助于克氏原螯虾白斑病毒病原的检测及其流行趋势预警。
草鱼细胞蛋白酶亚基β7与草鱼呼肠孤病毒非结构蛋白NS12相互作用
阙顺政, 王龙龙, 吕利群
2021, 45(9): 1500-1507.   doi: 10.11964/jfc.20210112589
[摘要](117) [HTML 全文](55) [PDF 2619KB](4)
摘要:
为研究草鱼I型呼肠孤病毒(grass carp reovirus, GCRV)非结构蛋白NS12的功能,实验利用酵母双杂交实验、GST融合蛋白沉降技术(GST pull-down)和对GCRV感染过表达宿主蛋白酶体亚基β7(proteasome subunit beta type 7, PSMB7)的草鱼卵巢细胞(grass carp ovarian cell,GCO)中ns12转录水平的表达量进行实时荧光定量PCR检测,研究PSMB7和NS12的相互作用。酵母双杂交实验结果表明,PSMB7与GCRV编码的膜相关的非结构蛋白NS12也存在着潜在相互作用。GST-pull-down检测结果证实PSMB7与GCRV编码的膜相关的非结构蛋白NS12存在相互作用;PSMB7过表达能够上调ns12在病毒感染过程中的转录水平表达量;免疫印迹验证NS12对于蛋白降解并不敏感。本实验室先前研究证实PSMB7在病毒感染过程中表达恒定。综上所述,这些结果揭示GCRV NS12与PSMB7存在分子间相互作用,但并没有作为PSMB7的底物。表明其可能竞争性地阻碍蛋白酶体复合物的形成。病毒蛋白干扰蛋白酶体复合物胞内PSMB7的积累可能是其一种针对蛋白酶体介导的先天免疫的免疫逃逸策略。
乌鳢水泡病毒P蛋白异构体的鉴定及其功能初探
秘琮然, 张永安, 涂加钢
2021, 45(9): 1508-1516.   doi: 10.11964/jfc.20210612906
[摘要](111) [HTML 全文](63) [PDF 2864KB](4)
摘要:
为了鉴定乌鳢水泡病毒(SHVV)磷蛋白(P)的异构体并研究其在病毒增殖中的作用,本研究扩增了SHVV的P基因,构建了原核表达质粒pET32a-P,通过Ni-NTA亲和层析柱纯化His-P蛋白,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体,利用该抗体对SHVV的P蛋白异构体进行鉴定。进一步利用增强性绿色荧光蛋白(EGFP)研究了P蛋白异构体的亚细胞定位,并通过定量PCR(qRT-PCR)、Western blot及TCID50研究了过表达P蛋白异构体对SHVV增殖的影响。结果显示,SHVV感染斑点叉尾鮰卵巢细胞(CCO)出现3条P蛋白带,进一步验证表明,其中2条带分别是P蛋白(又称P1)及其异构体P2。亚细胞定位实验发现P1和P2主要定位在细胞质,但是可以在核质中穿梭。在CCO细胞中过表达P1、P2均能促进SHVV增殖。因此,SHVV在感染过程中能产生P蛋白(P1)及其异构体P2,且P1和P2对SHVV增殖发挥重要作用。研究结果有助于阐明SHVV的致病机理以及弹状病毒P蛋白异构体的功能。
日本鳗鲡STAT3及其剪切异构体的克隆、亚细胞定位及功能分析
李文星, 郑妨, 凌露露, 梁英, 黄文树, 聂品, 黄贝
2021, 45(9): 1517-1529.   doi: 10.11964/jfc.20210512873
[摘要](75) [HTML 全文](44) [PDF 3327KB](8)
摘要:
为研究鱼类信号与转录激活因子3 (signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)在抗病毒免疫应答中的作用,实验利用逆转录PCR(RT-PCR)和RACE-PCR技术从日本鳗鲡中扩增获得了STAT3及其剪切异构体(AjSTAT3-LAjSTAT3-S)。AjSTAT3-L及AjSTAT3-S开放阅读框全长分别为2349和1470 bp,编码782和489个氨基酸。基因结构分析结果显示,AjSTAT3-L具有23个外显子,AjSTAT3-S缺失了第2、3、4、5、6、7及21个外显子。AjSTAT3-L类似于哺乳动物STAT3,由N端结构域(NTD,1~120位氨基酸)、卷曲螺旋结构域(CCD,140~313位氨基酸)、DNA结合结构域(DBD,325~462位氨基酸)和SH2结构域(577~672位氨基酸)构成。相较于AjSTAT3-LAjSTAT3-S缺失了整个CCD结构域,且NTD结构域也缺失了69个氨基酸。系统进化分析结果显示,AjSTAT3-LAjSTAT3-S位于硬骨鱼类STAT3分支的基部。脊椎动物STAT3聚为一支,并与STAT1和STAT4聚为一大支。免疫荧光结果显示,AjSTAT3-LAjSTAT3-S均定位于细胞质。此外,过表达AjSTAT3-LAjSTAT3-S能显著抑制Poly I∶C诱导的IFN和Mx启动子的活化。研究表明,实验所克隆鉴定的日本鳗鲡STAT3及其剪切异构体,均能负调控鱼类抗病毒免疫应答。
尼罗罗非鱼铁调素调节蛋白在宿主抵御病原菌侵染和调节铁稳态中的功能
尹晓雪, 綦伟伟, 木亮亮, 王安利, 叶剑敏
2021, 45(9): 1530-1544.   doi: 10.11964/jfc.20210612915
[摘要](85) [HTML 全文](36) [PDF 3959KB](9)
摘要:
为了研究铁调素调节蛋白(hemojuvelin,HJV)在硬骨鱼中抵御病原菌感染和维持自身铁稳态过程中的作用,实验扩增了尼罗罗非鱼铁调素调节蛋白基因(Onhjv)的开放阅读框(ORF),分析其在健康尼罗罗非鱼各组织中的分布模式及在抵御病原菌感染和调节铁稳态中的相关作用。结果显示,Onhjv的ORF全长由1 248 个碱基组成,编码415个氨基酸,在不同物种之间具有一定的保守性。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,Onhjv在尼罗罗非鱼各组织中广泛分布,并在肝脏中的表达量最高。在无乳链球菌或嗜水气单胞菌感染后,Onhjv在肝脏、脾脏、肠和鳃中的表达量均显著上调。体外头肾单核/巨噬细胞和肝细胞中Onhjv表达量在受到这2种病原菌应激下也显著上调。此外,在1和10 μmol/L FeCl3溶液刺激后,Onhjv表达量在肝脏、脾脏、肠和鳃等组织,以及头肾单核/巨噬细胞和肝细胞中的表达量也呈显著上调。受重组罗非鱼IL-6蛋白[(r)OnIL-6]刺激后,头肾单核/巨噬细胞中Onhjv表达量显著上调,表明炎症因子可以促进Onhjv表达。研究表明,尼罗罗非鱼铁调素调节蛋白在宿主抵御病原菌感染和维持铁稳态的过程中发挥作用。本实验为探究HJV在硬骨鱼中的生物学功能提供了参考,同时为进一步研究铁代谢在宿主防御病原菌感染过程中的重要作用提供理论指导。
无乳链球菌GD201008-001二元调控系统RscSR的鉴定及其对细菌应激适应性和毒力特性的影响
聂蒙, 马可, 曹青, 黄昊, 姬姝婷, 刘永杰
2021, 45(9): 1545-1554.   doi: 10.11964/jfc.20201012439
[摘要](114) [HTML 全文](59) [PDF 2984KB](4)
摘要:
为鉴定鱼源无乳链球菌GD201008-001二元调控系统(two-component system, TCS) RscSR并探究其功能,实验利用生物信息学方法预测到可能的RscSR,对其组成成分RscS和RscR的三维结构和保守结构域进行分析;构建基因缺失株ΔrscSR与互补株CΔrscSR,测定细菌的生长曲线,检测其耐酸应激、耐氧化应激、抗巨噬细胞吞噬和胞内存活能力,同时测定其对巨噬细胞的毒性和对小鼠的毒力。结果显示,RscSR具有典型的TCS结构特点,其中RscS具有组氨酸激酶结构域,RscR具有反应调节子结构;其编码基因缺失后,菌株耐酸、耐氧化、抗巨噬细胞吞噬和胞内存活能力及对巨噬细胞毒性均显著降低,而将该基因回补后各项能力均有所恢复;动物实验结果显示,野生株感染小鼠19 h内全部死亡,而ΔrscSR缺失株感染小鼠全部死亡时间为48 h。研究表明,RscSR在无乳链球菌应激适应性以及毒力方面发挥重要作用。
鳃基碘泡虫中国新记录及组织病理
王苗苗, 张金叶, 赵元莙
2021, 45(9): 1555-1562.   doi: 10.11964/jfc.20210612923
[摘要](81) [HTML 全文](45) [PDF 7486KB](0)
摘要:
为了鉴定感染鲤鳃的病原并分析其鳃部严重受损的病因,本研究运用形态计量学、分子生物学、系统发育学和组织病理学方法,对其进行了详细研究。结果显示,该致病黏孢子虫寄生于鲤鳃弓,孢子壳面观呈椭圆形或近圆形,缝面观呈柠檬形,顶面观呈橄榄形;孢子长9.2~11.8 μm,宽8.3~10.5 μm,厚4.4 μm;拥有2个大小不等的水滴形极囊,2个极囊前端略微靠拢,大极囊长3.5~4.7 μm、宽2.4~3.1 μm,小极囊长2.8~3.8 μm、宽1.8~2.6 μm,大、小极囊极丝分别缠绕5圈和3圈;部分孢子后端可以见“V”形褶皱,但未观察到囊间突起、黏液被膜和嗜碘泡。18S rDNA与已报道的鳃基碘泡虫相似度达99.69%. 因此,该寄生虫的形态学与分子生物学数据以及宿主信息表明,该种为鳃基碘泡虫,属中国新记录。孢囊发生在病鲤鳃部传入和传出动脉之间。由于孢囊体积增大,传入和传出动脉受到压迫而变形、堵塞;鳃丝基部也因此发生机械性断裂;部分孢囊周围结缔组织受到破坏。孢囊破裂后,孢子浸润到周围组织。研究表明,鳃基碘泡虫的孢囊压迫主血管,破坏鳃丝,致使鳃丝血流不畅、供血不足,进而导致鳃呼吸功能丧失,是病鲤致死的主要原因。本研究提供的鳃基碘泡虫的形态、分子和病理数据可为水产养殖中鳃基碘泡虫病的防控提供理论依据。
凡纳滨对虾虾苗细菌性玻化症(BVS)的病原、病理分析
王印庚, 于永翔, 刘潇, 张永刚, 张正, 廖梅杰, 李彬, 蔡欣欣, 荣小军, 罗坤
2021, 45(9): 1563-1573.   doi: 10.11964/jfc.20200912396
[摘要](120) [HTML 全文](54) [PDF 2902KB](3)
摘要:
为进一步查明对虾“玻璃苗”的主要致病原,实验通过对河北省沧州市凡纳滨对虾苗种玻化症进行了流行病学调查及病原、病理分析。结果发现,患病虾苗表现为活力降低、厌食直至空肠、空胃,虾体消瘦、暗浊;肝胰腺组织坏死性萎缩、轮廓模糊、颜色变浅呈淡黄色,甚至肝胰腺区由正常的饱满褐色组织变为无组织结构的“玻璃化”状态。组织病理观察结果显示,患病对虾肝小管上皮细胞坏死、脱落,肝小管中充斥大量的碎片组织,并逐步褐化、黑化,甚至肝小管组织大面积坏死,留有连片玻璃样均质化区域;肠道内充斥大量的组织碎片,绒毛膜脱落消失。超微组织病理观察发现,患病对虾肝小管上皮细胞的细胞膜消融,细胞器解体,细胞核固化;其后细胞解体、脱落,甚至肝小管组织结构解体消融;肝胰腺、肠道、胃黏膜周围发现大量细菌,优势菌株为杆状菌且呈弧形,未发现病毒粒子的存在。从患病虾苗分离出2株优势菌(Lv-A和Lv-B),经人工浸染实验发现,Lv-A和Lv-B可致凡纳滨对虾PL7苗种出现与自然患病相同的玻璃化症状,其半致死浓度分别为1.62×103和5.38×103 CFU/mL,致病力强。根据16S rDNAgyrB序列分析结果发现,Lv-A和Lv-B与溶藻弧菌、新喀里多尼亚弧菌和副溶血弧菌均有较高相似性。初步将该病命名为虾苗细菌性玻化症(shrimp postlarva bacterial vitrified syndrome,BVS)。药敏实验结果显示,Lv-A和Lv-B均对米诺环素、多西环素、萘啶酸等敏感,而对新霉素、吡哌酸、利福平等耐药。本研究为BVS的有效防控、保障对虾行业健康发展提供理论基础和技术支撑。
杀鲑气单胞菌灭活疫苗的制备及其在大菱鲆体内的免疫效果
郭慧敏, 丁圆媛, 王昊, 郑旭佳, 修云吉, 周顺
2021, 45(9): 1574-1583.   doi: 10.11964/jfc.20210612932
[摘要](88) [HTML 全文](39) [PDF 2882KB](3)
摘要:
为了预防大菱鲆疥疮病,本研究将杀鲑气单胞菌菌株HHSM1905经甲醛灭活制备成灭活疫苗,通过腹腔注射途径免疫健康大菱鲆;对免疫后大菱鲆血清抗体效价、血清溶菌酶 (LZM) 活性、酸性磷酸酶 (ACP) 活性及疫苗保护率进行测定;以β-actin为内参,对免疫相关基因(IL-1βTLR-5、MHC Ⅰ、MHC Ⅱ-α、CD4)表达情况进行定量PCR分析。结果显示,在免疫后2周时,疫苗组血清抗体效价显著高于对照组并达到最大值;疫苗组LZM活性在免疫2周时达到峰值,4周时仍与对照组保持显著差异;疫苗组ACP活性在免疫后的2周达到峰值,与对照组差异显著;灭活疫苗相对保护率(RPS)为72.72%。免疫组与对照组相比,IL-1β、TLR-5、MHC Ⅰ、MHC Ⅱ-α、CD4的表达量均呈上调趋势,与对照组差异显著。本研究成功制备了大菱鲆用杀鲑气单胞菌灭活疫苗,其对大菱鲆疥疮病能够起到一定的预防作用,可为大菱鲆养殖过程中疾病预防提供新方法。
一株新型大口黑鲈双RNA病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用
罗明菊, 李宁求, 林强, 牛银杰, 刘礼辉, 梁红茹, 罗霞, 付小哲
2021, 45(9): 1584-1591.   doi: 10.11964/jfc.20201112480
[摘要](118) [HTML 全文](40) [PDF 4782KB](4)
摘要:
为有效预防大口黑鲈双RNA病毒(largemouth bass birnavirus, LBBV),实验针对LBBV保守基因VP1设计特异性引物,构建重组质粒pMD-LBBV-VP1,通过优化PCR反应条件,提高检测方法的灵敏度和特异性,建立了大口黑鲈双RNA病毒的巢式RT-PCR检测方法,并采用该方法对实验室2017—2020年收集的304株样本进行检测。结果显示,巢氏引物F1/R1、F2/R2最佳工作浓度均为4 ×10−12 mol,最佳退火温度分别为64.1 °C和61.5 °C,当巢氏RT-PCR扩增35个循环时,可以检测质粒最低浓度为4.15个/µL拷贝数,最低模拟样品浓度为102 PFU/mL,与第1轮PCR相比,灵敏度均提高了10 000倍,同时检测9种不同病毒,仅LBBV出现明亮特异性条带,在304个样品中,第1轮PCR检出阳性样品14株,检出率为4.60%,巢式RT-PCR检出阳性样品28株,检出率为9.21%;本实验建立的巢式RT-PCR检测方法灵敏度高且特异性好,可用于LBBV的早期检测及防控。
综述
鱼类IRF家族在干扰素抗病毒免疫反应中的调控功能
赵祥, 张义兵
2021, 45(9): 1592-1604.   doi: 10.11964/jfc.20210712942
[摘要](85) [HTML 全文](45) [PDF 2957KB](4)
摘要:
干扰素调节因子(IRF)家族成员是一类重要的转录因子,在机体细胞感染病毒时单独或共同调控干扰素基因 (IFN) 的表达。IRF家族蛋白结构非常保守。其中N端DBD结构域赋予了IRF蛋白结合IFN启动子的功能,而C端IAD主要介导蛋白互作,因而不同IRF成员可能在不同的信号通路中发挥功能。哺乳动物IRF家族有9个成员,IRF1~9。鱼类IRF家族有11个成员,除了IRF1~9外,还包括硬骨鱼类特有的IRF11,以及在鸟类基因组中也存在的IRF10。哺乳类研究表明,IRF1/3/5/7/9在病毒感染的细胞中正调控IFN基因的表达,而IRF2则负调控IFN的表达。近十多年来,鱼类IRF家族的功能研究取得了重要进展,相关研究结论基本来自于体外的实验数据。本文综述了鱼类IRF家族成员的表达、亚细胞定位以及调控IFN抗病毒免疫反应的分子机制。
噬菌体在水产养殖业中的研究进展
陈愿, 张永安, 周洋
2021, 45(9): 1605-1615.   doi: 10.11964/jfc.20210312706
[摘要](113) [HTML 全文](52) [PDF 2697KB](12)
摘要:
随着水产养殖业的发展,养殖密度越来越高,细菌性疾病暴发频繁。现如今主流抗菌手段是抗生素,但其大规模且不规范的使用使得细菌耐药性问题越发严重。为了有效防治水产细菌性疾病,加快推进水产养殖业绿色发展,促进产业转型升级,人们亟需寻求新的抗菌手段来缓解当今的局面。噬菌体是一种感染细菌和古细菌的病毒,具有专一性强、不易产生抗性、代谢快、易开发及成本低等优点。在国内外被广泛研究,同时也被应用于多种疾病的防控,其相关产品也获得认可,但其本身存在的限制也不容忽视。本文首先综合介绍了噬菌体治疗的原理和优势,然后对噬菌体治疗在水产养殖动物细菌性疾病中的研究进展进行综述,并对噬菌体治疗现存的困难和应对策略进行讨论,最后在此基础上作出展望,期望能够为后续噬菌体在水产上的应用研究提供参考。

期刊介绍

  • 创刊:1964年  月刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国水产学会
  • 出版单位:科学出版社
  • 编辑单位: 《水产学报》编辑部

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